众所周知，卡尔费休试剂是测定各种物质中微量水分的种方法，这种方法自从1935年由卡尔费休提出后，直采用I2、SO2、吡啶、无水CH3OH(含水量在0.05%以下)配制而成，并且标准化组织把这个方法定为标准测微量水分，我们国家也把这个方法定为国家标准测微量水分。
　　1、卡尔费休试剂的原理：在水存在时，即样品中的水与卡尔费休试剂中的SO2与I2产生氧化还原反应。I2 SO2 2H2O → 2HI H2SO4
　　但这个反应是个可逆反应，当硫酸浓度达到0.05%以上时，即能发生逆反应。如果我们让反应按照个正方向进行，需要加入适当的碱性物质以中和反应过程中生成的酸。经实验证明，在体系中加入吡啶，这样就可使反应向右进行。
　　我们把这上面三步反应写成总反应式为：I2 SO2 H2O 3吡啶 CH3OH 2氢碘酸吡啶 甲基硫酸吡啶
　　从反应式可以看出1mol水需要1mol碘，1mol二氧化硫和3mol吡啶及1mol甲醇而产生2mol氢碘酸吡啶、1mol甲基硫酸吡啶。这是理论上的数据，但实际上，SO2、吡啶、CH3OH的用量都是过量的，反应完毕后多余的游离碘呈现红棕色，即可确定为到达终点。
　　2、卡尔费休试剂的配制与标定
　　若以甲醇作溶剂，则试剂中I2、SO2、C5H5N(含水量在0.05%以下)三者的克分子数比例为：I2︰SO2︰C5H5N = 1︰3︰10
　　这种试剂有效浓度取决于碘的浓度。新配制的试剂其有效浓度不断降低，其原因是由于试剂中各组分本身也含有些水分，但试剂浓度降低的主要原因是由些副反应引起的，较高消耗了部分碘。
　　配制：称85gI2→于干燥的有塞棕色烧瓶中→加670ml无水CH3OH→塞上瓶塞→振摇使I2全部溶解→加270ml吡啶→混匀→于冰水浴冷却→通干燥的SO2气体60g→塞上瓶塞→于暗处24小时后标定使用；
　　标定：先加50ml无水甲醇→于反应器中→接通电源→启动电磁搅拌器→用KF试剂滴入甲醇中使甲醇中尚残留的痕量水分与试剂达到终点(即指针到达定刻度，不记录KF试剂用量)→保持分钟→用10μl注射器从反应器加料口注入10μl蒸馏水(相当于0.01g水)→电流表指针接近零点→用KF试剂滴定到原定终点→记录。
　　3、卡尔费休试剂的配置步骤
　　对于固体样，如糖果必须预先粉碎，称0.30～0.50g样于称样瓶中：取50 ml甲醇 → 于反应器中，所加甲醇要能淹没电，用KF试剂滴定50 ml甲醇中痕量水 → 滴指针与标定时相当并且保持1min不变时 → 打开加料口 → 将称好的试样立即加入 → 塞上皮塞 → 搅拌 → 用KF试剂滴终点保持1min不变 → 记录。