众所周知，卡尔费休法是测定各种物质中微量水分的种方法，这种方法自从1935年由卡尔费休提出后，直采用I2、SO2、吡啶、无水CH3OH(含水量在0.05%以下)配制而成，并且标准化组织把这个方法定为标准测微量水分，我们国家也把这个方法定为国家标准测微量水分。
　　1、原理：在水存在时，即样品中的水与卡尔费休试剂中的SO2与I2产生氧化还原反应。
　　(1)I2 SO2 2H2O → 2HI H2SO4; 但这个反应是个可逆反应，当硫酸浓度达到0.05%以上时，即能发生逆反应。如果我们让反应按照个正方向进行，需要加入适当的碱性物质以中和反应过程中生成的酸。经实验证明，在体系中加入吡啶，这样就可使反应向右进行。
　　(2)C5H5N H2O I2 SO2 → 2氢碘酸吡啶;
　　硫酸酐吡啶生成硫酸酐吡啶不稳定，能与水发生反应，消耗部分水而干扰测定，为了使它稳定，我们可加无水甲醇。
　　(3)硫酸酐吡啶 CH3OH(无水)→ 甲基硫酸吡啶
　　我们把这上面三步反应写成总反应式为：
　　I2︰SO2︰C5H5N = 1︰3︰10
　　从反应式可以看出1mol水需要1mol碘，1mol二氧化硫和3mol吡啶及1mol甲醇而产生2mol氢碘酸吡啶、1mol甲基硫酸吡啶。这是理论上的数据，但实际上，SO2、吡啶、CH3OH的用量都是过量的，反应完毕后多余的游离碘呈现红棕色，即可确定为到达终点。
　　2、卡尔费休试剂的配制与标定
　　若以甲醇作溶剂，则试剂中I2、SO2、C5H5N(含水量在0.05%以下)三者的克分子数比例为
　　I2︰SO2︰C5H5N = 1︰3︰10
　　这种试剂有效浓度取决于碘的浓度。新配制的试剂其有效浓度不断降低，其原因是由于试剂中各组分本身也含有些水分，但试剂浓度降低的主要原因是由些副反应引起的，较高消耗了部分碘。这也说明了配制这种试剂要单配，分甲乙两种试剂并且分别贮存，临用时再混合，而且要标定。